LSM 990光谱复用器

分类：显微镜

厂家：蔡司

产地：德国

型号： ZEISS LSM 990 Spectral Multiplex

更新时间： 2026-01-08T09:01:49.000Z

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光谱成像荧光标签分离空间生物学癌症研究多通道成像活细胞成像

简介：

ZEISS LSM 990 Spectral Multiplex是一款先进的光谱成像系统，专为深入理解空间生物学而设计。它能够高效分离荧光标签，优化多蛋白标记实验，并消除自发荧光干扰。

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概述

参数

光谱范围 / Spectral Range : 380nm-900nm
探测器数量 / Number Of Detectors : 32个GaAsP检测器，2个NIR GaAs和GaAsP检测器
激光波长范围 / Laser Wavelength Range : 405nm-730nm
光谱分辨率 / Spectral Resolution : 10nm
荧光标签数量 / Number Of Fluorescent Labels : 最多可同时分离10个以上标签
信噪比 / Signal-To-Noise Ratio : 高
光学元件 / Optical Components : 低角度主分束器（MBS），全息光栅
自动化功能 / Automation Features : 支持Lambda扫描、线性解混和LSM Plus
样品厚度 / Sample Thickness : 40μm
图像分辨率 / Image Resolution : 高
数据处理 / Data Processing : 支持AI对象分割和统计分析

应用

1. 癌症研究中的光谱多重标记实验 2. 空间生物学研究 3. 多通道荧光成像 4. 大体积样品成像 5. 活细胞成像

特征

1. 高效光谱多重标记 2. 用户友好的实验设计 3. 实时光谱解混 4. 超越成像的工作流程自动化 5. 优化的光效率系统

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具有荧光开关的核壳金属有机框架用于触发增强的光动力治疗
核壳结构金属有机框架荧光开关光动力治疗

通过将无机纳米粒子整合到金属有机框架（MOF）中构建混合纳米材料（NP@MOF）已展现出获得增强性、协同性及拓展性新物理化学特性的卓越潜力。然而具有多功能特性的反向结构（MOF@NP）鲜有报道。方法：我们开发了一种简便的原位生长法将MOF纳米粒子整合至无机纳米材料中，并设计荧光开关触发增强型光动力治疗。体外研究了"开关"对光动力活性的影响，通过荷瘤小鼠模型评估该开关触发的增强光动力治疗效果。结果：在荧光沸石咪唑酯骨架（ZIF-8）纳米粒子表面生长MnO2获得具有荧光开关功能的核壳卫星结构；通过在卟啉锆基MOF纳米粒子（ZrMOF）表面生长MnO2构建了具有光动力活性开关功能的核壳结构。MnO2可使荧光和光动力活性关闭，谷胱甘肽（GSH）则能重新激活。ZrMOF@MnO2的GSH响应性光动力活性激活通过MnO2还原反应显著耗竭细胞内GSH，从而触发增强型光动力治疗效果。最终GSH还原产生的Mn2+为磁共振成像引导的肿瘤治疗提供了平台。结论：本研究揭示了无机纳米材料对MOF性能的影响，为多功能MOF-无机纳米复合物的理性设计提供了新思路。
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[分子生物学方法] 植物长链非编码RNA 第1933卷（方法与实验方案）|| 用于可视化植物中RNA-蛋白质相互作用的三元荧光互补（TriFC）检测法
RNA-蛋白质相互作用长链非编码RNA TriFC 烟草瞬时表达在体可视化

RNA-蛋白质相互作用在多种真核生物过程中发挥重要作用。对植物中RNA-蛋白质复合体亚细胞定位的分子成像对于理解这些相互作用至关重要。然而，迄今为止尚未开发出活体植物中RNA-蛋白质相互作用的成像方法。最近，我们通过烟草叶片瞬时表达建立了一个三分子荧光互补（TriFC）系统，用于活体观察RNA-蛋白质相互作用。该方法将传统的双分子荧光互补（BiFC）系统与MS2系统（噬菌体MS2衣壳蛋白[MCP]及其结合RNA序列[MS2序列]）相结合来标记长链非编码RNA。目标RNA被6xMS2标记，MCP和RNA结合蛋白则与YFP片段融合。将这些融合RNA和蛋白的DNA构建体通过农杆菌悬浮液浸润到烟草叶片中，通过共聚焦显微镜观察活体RNA-蛋白质相互作用。
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[18F]-SuPAR：一种用于无创成像DNA损伤依赖性聚（ADP-核糖）聚合酶活性的放射性氟化探针

聚（ADP核糖）聚合酶（PARP）通过靶蛋白上的聚（ADP核糖）翻译后修饰发挥多种以DNA和细胞应激为核心的功能。PARP1和PARP2亚型主要负责监测DNA完整性，是基因组抵御DNA断裂的第一道防线。本研究开发了一种新型探针[18F]-SuPAR，用于正电子发射断层扫描（PET）无创成像PARP-1/2活性。[18F]-SuPAR是一种放射性氟化烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）类似物，可被PARP-1/2识别并整合到聚（ADP核糖）（PAR）的长支链聚合物中。通过PARP抑制剂他拉唑帕尼（目前处于III期临床试验的强效PARP抑制剂）处理后体内放射示踪剂摄取量降低，以及离体放射示踪剂类似物与聚（ADP核糖）的共定位，证实了PARP-1/2活性的测量结果。利用[18F]-SuPAR，我们绘制了乳腺癌和宫颈癌异种移植小鼠模型在放疗后PARP-1/2剂量和时间依赖性激活图谱。单次相当于立体定向消融放疗剂量的辐射治疗后八小时内，通过[18F]-SuPAR PET即可确定肿瘤治疗反应。
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实验方案推荐

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纳米材料与技术实验方案
1. 实验设计与方法选择：本研究采用原位生长法将金属有机框架（MOF）纳米颗粒整合到无机纳米材料（MnO₂）中。通过合成ZIF-8和ZrMOF纳米颗粒，随后在其表面生长MnO₂纳米点或纳米片，形成核-卫星或核-壳结构。利用MnO₂的荧光淬灭效应和谷胱甘肽（GSH）还原作用调控荧光与光动力活性。体外实验包括荧光光谱、单线态氧生成检测、细胞毒性测试及MRI弛豫率测定；体内实验使用U87MG荷瘤小鼠评估光动力疗效及MRI引导治疗效果。 2. 样本选择与数据来源：样本包含合成的ZIF-8、ZrMOF、ZIF-FITC@MnO₂和ZrMOF@MnO₂纳米颗粒。数据源自实验室合成与表征（如透射电镜TEM、高角环形暗场扫描透射电镜HAADF-STEM、X射线光电子能谱XPS、动态光散射DLS、紫外-可见光谱UV-vis、荧光光谱、液质联用LC-MS、电感耦合等离子体质谱ICP）。体内数据来自U87MG肿瘤小鼠模型。 3. 实验设备与材料清单：设备：透射电镜（TEM）、高角环形暗场扫描透射电镜（HAADF-STEM）、X射线光电子能谱（XPS）、动态光散射（DLS）、紫外-可见分光光度计、荧光光谱仪、液质联用系统（LC-MS）、电感耦合等离子体仪器（ICP）、MRI系统、共聚焦显微镜（蔡司LSM 780）、酶标仪。材料：硝酸锌（Zn(NO₃)₂）、2-甲基咪唑、氯氧化锆（ZrOCl₂）、四(4-羧基苯基)卟啉（TCPP）、苯甲酸、高锰酸钾（KMnO₄）、谷胱甘肽（GSH）、单线态氧传感器绿（SOSG）、噻唑蓝（MTT）、4',6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）、钙黄绿素AM/碘化丙啶（PI）、聚乙二醇（PEG）、N,N-二甲基甲酰胺（DMF）、甲醇、水、乙酸钠、磷酸盐缓冲液（PBS）。 4. 实验流程与操作步骤：ZIF-8和ZrMOF纳米颗粒在甲醇或DMF中按特定反应条件合成；MnO₂原位生长通过向纳米颗粒溶液搅拌加入水相KMnO₄实现。分别在有无GSH处理条件下测量荧光强度与单线态氧生成量。细胞毒性通过激光照射后的MTT比色法及活/死染色评估。体内实验包括尾静脉注射PEG化纳米颗粒，继而进行激光照射与MRI成像。 5. 数据分析方法：数据分析包含荧光强度测定、SOSG定量单线态氧、MTT吸光度计算细胞存活率、流式细胞术分析凋亡、ICP检测Mn释放量、MRI弛豫率（r₁）计算及肿瘤生长/生存率的统计学分析。
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生物技术实验方案
1. 实验设计与方法选择：TriFC系统将双分子荧光互补（BiFC）系统与MS2系统结合用于RNA成像。目标RNA标记6xMS2重复序列，MCP和RNA结合蛋白与YFP片段融合。当RNA-蛋白相互作用时，YFP片段互补发出荧光，通过共聚焦显微镜观察。 2. 样本选择与数据来源：使用2-4周龄（6-10叶期）本氏烟草植株。特定构建体包括pENTR-ELENA1（长链非编码RNA）、pENTR-Med19a（RNA结合蛋白）和pENTR-MCP。 3. 实验设备与材料清单：包含目标载体（pBA3130、pBA3132、pBA3134、pBA3136、pBA-6xMS2-DC、pBA-DC-6xMS2）、入门克隆、LR Clonase II、大肠杆菌DH5α、农杆菌GV3101、抗生素（壮观霉素、卡那霉素）、LB培养基、乙酰丁香酮、共聚焦激光扫描显微镜（ZEISS LSM 780）及ZEN图像分析仪。 4. 实验流程与操作步骤：通过LR反应构建载体并转化至大肠杆菌和农杆菌。制备农杆菌培养液，混合后用注射器渗透烟草叶片。植株孵育2-3天后，在514nm激发光和520-550nm发射光下用共聚焦显微镜观察YFP信号。 5. 数据分析方法：使用ZEN图像分析仪分析YFP荧光信号以确认RNA-蛋白相互作用。
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生物医学工程实验方案
1. 实验设计与方法选择：本研究设计并合成了放射性氟化NAD类似物（[18F]-SuPAR）作为PARP-1/2底物。通过体外实验（电泳迁移率变动分析，EMSA）评估底物活性及抗降解能力。在异种移植小鼠模型（MDA-MB-231乳腺癌和HeLa宫颈癌）中开展PET/CT成像，监测放疗后及PARP抑制剂（talazoparib）治疗期间的PARP-1/2活性。离体分析包括放射自显影、免疫荧光和共聚焦显微镜技术，以验证示踪剂与PAR的共定位。 2. 样本选择与数据来源：使用人癌细胞系（HeLa和MDA-MB-231）进行体外实验，并在免疫缺陷小鼠（重度联合免疫缺陷小鼠和裸鼠）中建立异种移植肿瘤。成像后采集组织进行离体分析。 3. 实验设备与材料清单：设备包括Kimtron IC 225辐照仪（用于放疗）、西门子Inveon PET/CT扫描仪（用于成像）、伽马计数器（测量放射性）、HPLC系统（Dionex系统，用于稳定性分析）、显微镜（蔡司AxioImager M1、LSM 710共聚焦显微镜，用于组织学分析）及各类试剂（如PARP-1酶、NAD、talazoparib、抗体）。 4. 实验流程与操作步骤：[18F]-SuPAR合成涉及放射性氟化和点击化学。体外EMSA评估PARP-1自身修饰。细胞摄取实验测定辐照后示踪剂滞留量。活体实验中，小鼠接受辐照后注射示踪剂并进行动态成像。离体实验中，组织切片用于放射自显影和免疫荧光分析，关联示踪剂摄取与PAR水平。 5. 数据分析方法：采用ImageJ进行凝胶定量分析，GraphPad Prism进行统计检验（t检验、ANOVA、Tukey's HSD、皮尔逊相关性），并通过Inveon Research Workplace中的动力学建模获取示踪剂滞留参数。
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厂家介绍

蔡司是一家在光学和光电领域具有国际领先地位的技术企业。在上一财年，蔡司集团在半导体制造技术、工业质量与研究、医疗技术和消费市场四个领域创造了总计75亿欧元的年收入（现状：2021年9月30日）。蔡司为其客户开发、生产和分销用于工业计量和质量保证的高度创新解决方案，用于生命科学和材料研究的显微镜解决方案，以及用于眼科和显微外科诊断和治疗的医疗技术解决方案。蔡司这个名字也是领先的光刻光学的代名词，它被芯片行业用来制造半导体元件。全球对引领潮流的蔡司品牌产品，如眼镜镜片、相机镜头和双筒望远镜有需求。