为甲型流感病毒内核中心组件配备量子点

摘要： 甲型流感病毒（IAV）作为公共卫生威胁，其包膜内含有病毒核糖核蛋白复合物（vRNP），这些复合物对IAV生命周期的各个环节都至关重要。通过量子点（QDs）同时标记vRNP复合物和病毒包膜，有助于实现单个IAV感染宿主细胞的全程长期追踪，这为揭示IAV感染机制提供了潜在价值。然而，尽管已有一些针对病毒包膜的QDs标记策略，目前尚缺乏将QDs与IAV内部vRNP复合物偶联的方法。本研究设计了一种基于电穿孔的便捷策略，结合抗体结合技术，将绿色QDs标记的核蛋白抗体（GQDs-NPAb）导入H1N1病毒株，实现了vRNP复合物的QDs标记（H1N1(GQDs)）。在20 nM GQDs-NPAb、20毫秒单脉冲及750 V/cm脉冲强度的最优条件下，实际标记效率约34%，且H1N1(GQDs)保留了93%的感染活性。随后通过温和高效的肼-醛基策略，用红色QDs（RQDs）标记H1N1(GQDs）的包膜，实现了双重标记。当RQDs浓度为5 nM（最优条件）时，双重标记实际效率可达11%，且双标记H1N1仍保持93%的感染活性。由于不同IAV亚型的组分与结构相似，该双重标记策略可推广至H9N2等其他亚型。